Kei te monokia a Javascript i to kaitirotiro.Ina monoa te javascript, karekau etahi mahi o tenei paetukutuku e mahi.
Javier Fidalgo, * Pierre-Antoine Deglesne, * Rodrigo Arroyo, * Lilian Sepúlveda, * Evgeniya Ranneva, Philippe Deprez Department of Science, Skin Tech Pharma Group, Castello D'Empúries, Catalonia, Spain * Kei enei kaituhi etahi mohiotanga mo tenei mahi Equal he papamuri takoha: Ko te waikawa hyaluronic (HA) he polysaccharide puta noa i whakamahia hei hanga i nga whakakii kiri mo nga kaupapa rerehua.I te mea he maha nga ra o te haurua o te ora i roto i nga kopa tangata, ka whakarereketia matū nga whakakī kiri e ahu mai ana i te HA kia roa ai te ora o te tinana.Ko te whakarereketanga tino nui i roto i nga whakakī a te HA arumoni ko te whakamahi i te 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) hei kaihoko whakawhiti ki te whakawhiti i nga mekameka HA.Ko te BDDE te toenga, kaore ano i te tauhohe, ka kiia he kore paitini i te <2 nga wahanga mo te miriona (ppm);no reira, ko te toenga o te BDDE i roto i te whakakii dermal whakamutunga me tatau ki te whakarite i te haumaru o te manawanui.Rauemi me nga tikanga: Ko tenei rangahau e whakaatu ana i te kitenga me te tohu o te hua-a-muri o te tauhohenga honohono i waenga i te BDDE me te HA i raro i nga tikanga kawakore ma te whakakotahi i te chromatography wai me te spectrometry papatipu (LC-MS).Hua: I muri i nga tātaritanga rereke, i kitea ko nga ahuatanga kawakore me te teitei o te pāmahana i whakamahia ki te whakakore i te HA-BDDE hydrogel i whakatairanga i te hanganga o tenei hua hou, te "propylene glycol-like" compound.I whakapumautia e te tātaritanga LC-MS he rite tonu te papatipu monoisotopic o te hua-a ki te BDDE, he rereke te waa pupuri (tR), me te momo whakaurunga UV rereke (λ=200 nm).Kaore i rite ki te BDDE, i kitea i roto i te LC-MS tātaritanga i raro i nga tikanga inenga ano, ko tenei hua-a-hua he teitei ake te kite i te 200 nm.Whakamutunga: Ko enei hua e tohu ana kaore he epoxide i roto i te hanganga o tenei puhui hou.Kei te tuwhera te matapaki ki te aromatawai i te tupono o tenei hua hou ka kitea i roto i te hanga o te HA-BDDE hydrogel (HA dermal filler) mo nga kaupapa arumoni.Kupumatua: waikawa hyaluronic, HA dermal filler, cross-linked hyaluronic acid, BDDE, LC-MS analysis, BDDE by-product.
Ko nga whakakii i runga i te waikawa hyaluronic (HA) ko nga mea tino rongonui me te rongonui mo nga mahi whakapaipai.1 Ko tenei whakakī kiri he hydrogel, ko te tikanga ka tito he >95% te wai me te 0.5-3% HA, e hoatu ana ki a ratou he hanga reera.Ko te 2 HA he polysaccharide me te waahanga matua o te matrix extracellular o nga vertebrates.Ko tetahi o nga kai.Kei roto ko te (1,4) -glucuronic acid-β (1,3) -N-acetylglucosamine (GlcNAc) tukurua waeine disaccharide e hono ana e nga here glycosidic.He rite tonu tenei tauira haupapa ki nga rauropi katoa.Ka whakatauritea ki etahi whakakī-a-pūmua (pērā i te collagen), ka hangaia e tenei taonga te HA hei ngota ngota koiora tino pai.Ka taea e enei whakakii te whakaatu i te raupapatanga o te raupapa waikawa amino e mohiotia ana e te punaha mate o te manawanui.
Ina whakamahia hei whakakii kiri, ko te herenga nui o HA ko te tere o te hurihanga i roto i nga kopa na te mea he whanau motuhake o nga whaariki e kiia nei ko hyaluronidases.I tenei wa, he maha nga whakarereketanga matū i roto i te hanganga HA kua whakaahuahia hei whakanui ake i te haurua o te HA i roto i nga kopa.3 Ko te nuinga o enei whakarereketanga e ngana ana ki te whakaiti i te urunga o te hyaluronidase ki nga polysaccharide polymers ma te whakawhiti hononga HA mekameka.Na reira, na te hanganga o nga piriti me nga hononga kovalent intermolecular i waenga i te hanganga HA me te kaihoko whakawhiti, ka nui ake nga hua whakaheke anti-enzyme i te HA taiao.4-6
I tenei wa, ko nga matū whakawhiti matū e whakamahia ana ki te whakaputa i te HA honohono ko te methacrylamide, 7 hydrazide, 8 carbodiimide, 9 divinyl sulfone, 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) Me te poly(ethylene glycol) diglycidyl ether.Ko te 10,11 BDDE te kaihoko honohono tino whakamahia i tenei wa.Ahakoa kua whakamatauria he haumaru enei momo hydrogels mo nga tekau tau, ko nga kaihoko honohono e whakamahia ana he reagents tauhohenga pea he cytotoxic, a, i etahi wa, he mutagenic.12 No reira, me nui te toenga o te toenga i roto i te hydrogel whakamutunga.Ko te BDDE ka kiia he haumaru ina iti iho te kukū o te toenga i te 2 nga wahanga mo ia miriona (ppm).4
He maha nga tikanga ki te kite i te kukū BDDE iti-toenga, tohu hono-whakawhiti me te tuunga whakakapinga i roto i nga hau hydrogels, penei i te chromatography hau, te chromatography whakakore rahi i honoa ki te spectrometry papatipu (MS), nga tikanga ine ine resonance autō karihi (NMR), me Ko te raupapa o te diode i honoa te mahi teitei o te chromatography wai (HPLC).13-17 Ko tenei rangahau e whakaatu ana i te kitenga me te tohu o te hua-a-muri i roto i te hauwai hau hono-whiti whakamutunga i hangaia e te tauhohenga o te BDDE me te HA i raro i nga tikanga kawakore.HPLC me te wai chromatography-papatipu spectrometry (LC-MS tātaritanga).I te mea kaore i te mohiotia te paitini o tenei hua-a-waho o BDDE, e taunaki ana matou kia whakatauhia te toenga inenga kia rite ki te tikanga e mahia ana i runga i te BDDE i te hua whakamutunga.
Ko te tote konutai o HA (Shiseido Co., Ltd., Tokyo, Japan) he taimaha ngota o ~1,368,000 Da (tikanga Laurent) 18 me te pokey intrinsic o 2.20 m3/kg.Mo te tauhohenga whakawhiti, BDDE (≥95%) i hokona mai i Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA).I hokona mai i te Kamupene Sigma-Aldrich te saline phosphate buffered me te pH 7.4.Ko nga whakarewa katoa, te acetonitrile me te wai i whakamahia ki te tātaritanga LC-MS i hokona mai i te kounga o te kounga HPLC.Ko te waikawa Formic (98%) ka hokona hei reagent grade.
I mahia nga whakamatautau katoa i runga i te punaha UPLC Acquity (Waters, Milford, MA, USA) me te hono atu ki te API 3000 triple quadrupole spectrometer papatipu kua mau ki te puna katote hiko (AB SCIEX, Framingham, MA, USA).
I timatahia te whakahiatotanga o nga hau-a-whakawhitinga HA hydrogels ma te whakauru i te 198 mg o te BDDE ki te otinga 10% (w / w) konutai hyaluronate (NaHA) i te aroaro o te 1% alkali (konutai hydroxide, NaOH).Ko te kukū BDDE whakamutunga i roto i te ranunga tauhohenga he 9.9 mg/mL (0.049 mM).Na, ko te ranunga tauhohenga ka tino whakaranuhia, ka whakakotahihia ka tukuna kia haere tonu ki te 45°C mo te 4 haora.19 Ka mau tonu te pH o te tauhohenga ki te ~12.
I muri mai, ka horoia te ranunga tauhohenga ki te wai, a ka tātarihia te HA-BDDE hydrogel whakamutunga ka diluted ki te PBS buffer ki te whakatutuki i te kohinga HA o 10 ki te 25 mg / mL, me te pH whakamutunga o 7.4.Hei whakahoroi i nga wairere HA hono-whakawhitinga kua mahia, ko enei wairere katoa ka autoclaved (120°C mo te 20 meneti).Ko te BDDE-HA hydrogel kua purea ka rongoa ki te 4°C tae noa ki te tātari.
Hei tātari i te BDDE kei roto i te hua HA hono-whakawhitinga, ka paunatia he tauira 240 mg me te whakauru ki roto i te poka pokapū (Microcon®; Merck Millipore, Billerica, MA, USA; rōrahi 0.5 mL) me te centrifuged i te 10,000 rpm i te pāmahana rūma. 10 meneti.He 20 µL o te wai kume-iho ka kohia, ka tātarihia.
Hei tātari i te paerewa BDDE (Sigma-Aldrich Co) i raro i nga tikanga kawakore (1%, 0.1% me 0.01% NaOH), mena ka tutuki nga tikanga e whai ake nei, ko te tauira wai ko 1:10, 1:100, ki runga ranei 1:1,000,000 Mena e tika ana, whakamahia te wai whakaheke iona MilliQ hei tātari.
Mo nga rauemi timata i whakamahia i roto i te tauhohenga honohono (HA 2%, H2O, 1% NaOH, me te 0.049 mM BDDE), 1 mL o ia tauira kua whakaritea mai i enei rawa i tātarihia ma te whakamahi i nga tikanga tātaritanga.
Hei whakatau i te motuhake o nga tihi ka puta i te mapi katote, 10 µL o 100 ppb BDDE otinga paerewa (Sigma-Aldrich Co) i taapirihia ki te tauira 20 µL.I tenei keehi, ko te kukū whakamutunga o te paerewa i ia tauira ko te 37 ppb.
Tuatahi, whakarite he otinga kararehe BDDE me te kukū o te 11,000 mg/L (11,000 ppm) ma te diluting 10 μL o te BDDE paerewa (Sigma-Aldrich Co) me te 990 μL MilliQ wai (kiato 1.1 g/mL).Whakamahia tenei otinga hei whakarite i te wairewa BDDE 110 µg/L (110 ppb) hei waimeha paerewa takawaenga.Na, whakamahi i te waimeha paerewa BDDE takawaenga (110 ppb) ki te whakarite i te pihi paerewa ma te whakamaarama i te waimeha takawaenga e hia nga wa kia tutuki ai te kukū e hiahiatia ana o 75, 50, 25, 10, me te 1 ppb.Ka whakaatuhia i te Whakaahua 1, ka kitea he pai te raupapa o te BDDE paerewa mai i te 1.1 ki te 110 ppb (R2> 0.99).I tukuna ano te pihi paerewa i roto i nga whakamatautau motuhake e wha.
Whakaatu 1 BDDE anau whakatikatika paerewa i whiwhihia e te LC-MS tātaritanga, i kitea ai he hononga pai (R2>0.99).
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu.
Hei tautuhi me te ine i nga paerewa BDDE kei roto i te HA hono-whakawhiti me nga paerewa BDDE i roto i te otinga turanga, i whakamahia te tātaritanga LC-MS.
I tutuki te wehenga chromatographic i runga i te pou LUNA 2.5 µm C18(2)-HST (50×2.0 mm2; Phenomenex, Torrance, CA, USA) me te pupuri i te pāmahana rūma (25°C) i te wā o te tātari.Ko te wahanga pūkoro he acetonitrile (wairewa A) me te wai (wairewa B) kei roto 0.1% te waikawa formic.Ko te wahanga pukoro ka whakahekehia e te haupapa rōnaki.Ko te rōnaki e whai ake nei: 0 meneti, 2% A;1 meneti, 2% A;6 meneti, 98% A;7 meneti, 98% A;7.1 meneti, 2% A;10 meneti , 2% A. Ko te wa oma he 10 meneti me te rōrahi werohanga he 20 µL.Ko te wa pupuri o BDDE mo te 3.48 meneti (mai i te 3.43 ki te 4.14 meneti i runga i nga whakamatautau).I pupuhihia te waahi waea i te tere rere o te 0.25 mL / min mo te LC-MS tātaritanga.
Mo te tātaritanga BDDE me te ine ine a MS, ka honoa te punaha UPLC (Waters) me te API 3000 triple quadrupole mass spectrometer (AB SCIEX) kua mau ki te puna katote hiko, ka mahia te tātaritanga i roto i te aratau katote pai (ESI+).
E ai ki te waahanga o te katote i mahia i runga i te BDDE, ko te waahanga me te kaha teitei i whakatauhia ko te waahanga e rite ana ki te 129.1 Da (Whakaahua 6).Na reira, i roto i te aratau aroturuki katote-maha (MIM) mo te ine, ko te huringa papatipu (papati-ki-te utu [m / z]) o BDDE ko 203.3 / 129.1 Da.Ka whakamahia hoki te aratau matawai (FS) me te aratau katote hua (PIS) mo te tātaritanga LC-MS.
Hei manatoko i te motuhake o te tikanga, i tātarihia he tauira patea (waahanga pūkoro tuatahi).Kaore he tohu i kitea i roto i te tauira tuwhera me te huringa papatipu o 203.3 / 129.1 Da.Mo te whakahokiruatanga o te whakamatautau, 10 nga werohanga paerewa o te 55 ppb (i waenganui o te arai whakatikatika) i tātarihia, ka puta te toenga o te inenga paerewa (RSD) <5% (kaore nga raraunga i whakaatuhia).
Ko te toenga o te ihirangi BDDE i inehia i roto i te waru o nga momo BDDE honohono-whakawhitinga-whakawhitinga HA hydrogels, e rite ana ki nga whakamatautau motuhake e wha.Ka rite ki te korero i roto i te waahanga "Materials and Methods", ka aromatawaihia te inenga e te uara toharite o te regression curve o te BDDE dilution paerewa, e rite ana ki te tihi ahurei i kitea i te whakawhitinga papatipu BDDE o 203.3 / 129.1 Da, me te pupuri. te wa o te 3.43 ki te 4.14 meneti Kaore e tatari.Ko te Whakaahua 2 e whakaatu ana i tetahi tauira chromatogram o te paerewa tohutoro 10 ppb BDDE.Ko te Ripanga 1 he whakarāpopoto i te toenga o te BDDE o nga wairere rereke e waru.Ko te awhe uara he 1 ki te 2.46 ppb.Na reira, ko te toenga o te BDDE i roto i te tauira ka whakaaetia mo te whakamahi tangata (<2 ppm).
Whakaahua 2 Ion chromatogram o 10 ppb BDDE paerewa tohutoro (Sigma-Aldrich Co), MS (m / z) whakawhiti i whiwhi i te LC-MS tātaritanga o 203.30 / 129.10 Da (i roto i te aratau MRM pai).
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;MRM, te aroturuki tauhohenga maha;MS, papatipu;m/z, ōwehenga papatipu ki te utu.
Kia mahara: Ko nga tauira 1-8 he hauwai BDDE hono-whakawhiti-a-aunoa.Ko te toenga o te BDDE i roto i te hydrogel me te tihi o te wa pupuri BDDE ka korerotia ano.Ka mutu, ka purongo ano te noho o nga tihi hou me nga waa pupuri rereke.
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;HA, waikawa hyaluronic;MRM, te aroturuki tauhohenga maha;tR, te wa pupuri;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;RRT, wa pupuri whanaunga.
Ko te mea whakamiharo, ko te tātaritanga o te LC-MS katote chromatogram i whakaatu mai i runga i nga tauira katoa o nga tauira HA hydrogel kua honoa-autoclaved, he nui ake te tihi i te wa poto o te pupuri i te 2.73 ki te 3.29 meneti.Hei tauira, ko te Whakaahua 3 e whakaatu ana i te chromatogram katote o tetahi tauira HA hono-whakawhiti, kei reira ka puta mai he tihi taapiri i te waa pupuri rereke mo te 2.71 meneti.Ko te wa pupuri whanaunga (RRT) i kitea i waenga i te tihi hou i kitea me te tihi mai i te BDDE i kitea he 0.79 (Ripanga 1).I te mea e mohio ana matou he iti ake te pupuri i te tihi hou i kitea i roto i te pou C18 i whakamahia i roto i te tātaritanga LC-MS, ka rite pea te tihi hou ki tetahi puhui polar ake i te BDDE.
Whakaahua 3 Ion chromatogram o te tauira HA hydrogel hono-whiti i whiwhi i te LC-MS (MRM papatipu hurihanga 203.3/129.0 Da).
Whakapoto: HA, waikawa hyaluronic;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;MRM, te aroturuki tauhohenga maha;RRT, wa pupuri whanaunga;tR, te wa pupuri.
Hei whakakore i te tupono ko nga tihi hou e kitea ana he poke i te tuatahi i roto i nga rawa i whakamahia, i wetewetehia enei rawa ma te whakamahi i te tikanga tātari LC-MS ano.Ko nga mea timatanga i tātarihia ko te wai, 2% NaHA i roto i te wai, 1% NaOH i roto i te wai, me te BDDE i te kukū kotahi i whakamahia i roto i te tauhohenga honohono.Ko te chromatogram katote o te rauemi timata i whakamahia kaore i whakaatu he puhui, he tihi ranei, a ko tona wa pupuri e rite ana ki te tihi hou i kitea.Ko tenei meka e whakakore ana i te whakaaro ehara i te mea kei roto noa i nga mea timatanga he puhui, he matū ranei e whakararu ana i te tikanga tātari, engari kaore he tohu o te paheketanga whakawhiti ki etahi atu hua taiwhanga.Ko nga uara kukū i whiwhi i muri i te tātaritanga LC-MS o te BDDE me nga tihi hou e whakaatuhia ana i te Ripanga 2 (tauira 1-4) me te chromatogram katote i te Whakaahua 4.
Tuhipoka: Ko nga tauira 1-4 e rite ana ki nga rauemi mata e whakamahia ana hei whakaputa i te BDDE honohono-a-aunoa HA hydrogels.Ko enei tauira kaore i te autoclaved.
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;HA, waikawa hyaluronic;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;MRM, te aroturuki tauhohenga maha.
Ko te ahua 4 e rite ana ki te LC-MS chromatogram o tetahi tauira o te rauemi mata e whakamahia ana i roto i te tauhohenga whakawhiti o HA me BDDE.
Tuhipoka: Ko enei katoa ka ine i te kukū me te ōwehenga e whakamahia ana hei whakatutuki i te tauhohenga honohono.Ko nga tau mo nga rawa mata kua wetewetehia e te chromatogram e rite ana ki: (1) wai, (2) 2% HA wairewa wai, (3) 1% NaOH wairewa wai.Ka mahia te tātaritanga LC-MS mo te huringa papatipu o 203.30/129.10 Da (i roto i te aratau MRM pai).
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;HA, waikawa hyaluronic;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;MRM, te aroturuki tauhohenga maha.
I akohia nga ahuatanga i puta ai te hanganga o nga tihi hou.Hei ako me pehea nga tikanga tauhohenga e whakamahia ana ki te whakaputa i te HA hydrogel honohono-whiti e pa ana ki te tauhohenga o te kaihoko whakawhiti BDDE, e arai ana ki te hanganga o nga tihi hou (ka taea e nga hua), i mahia nga inenga rereke.I roto i enei whakatau, i akohia e matou, i tātarihia te BDDE crosslinker whakamutunga, i tukinotia ki nga rereke rereke o te NaOH (0%, 1%, 0.1%, me te 0.01%) i roto i te reo wai, i muri mai me te kore autoclaving ranei.Ko te tikanga huakita ki te whakatairite i nga ahuatanga ano he rite ki te tikanga i whakamahia hei whakaputa i te HA hydrogel hono-whiti.Ka rite ki te korero i roto i te waahanga "Materials and Methods", ko te whakawhitinga papatipu o te tauira i tātarihia e LC-MS ki 203.30 / 129.10 Da.Ko te BDDE me te kukū o te tihi hou ka tatauhia, ka whakaatuhia nga hua ki te Ripanga 3. Kaore i kitea he tihi hou i roto i nga tauira kaore i te autoclaved, ahakoa te ahua o te NaOH i roto i te otinga (tauira 1-4, Ripanga 3).Mo nga tauira autoclaved, ka kitea nga tihi hou i te aroaro o te NaOH i roto i te otinga, me te ahua o te hanganga o te tihi ka whakawhirinaki ki te kohinga NaOH i roto i te otinga (tauira 5-8, Ripanga 3) (RRT = 0.79).Ko te Whakaaturanga 5 e whakaatu ana i tetahi tauira o te chromatogram katote, e whakaatu ana i nga tauira autoclaved e rua i te aroaro, i te ngaro ranei o NAOH.
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;MRM, te aroturuki tauhohenga maha.
Tuhipoka: Ko te chromatogram o runga: I tukuna te tauira ki te 0.1% NaOH wairewa wai me te autoclaved (120°C mo te 20 meneti).Te chromatogram o raro: Karekau te tauira i tukuna ki te NaOH, engari i werohia i raro i nga tikanga ano.Ko te huringa papatipu o 203.30 / 129.10 Da (i roto i te aratau MRM pai) i tātarihia e LC-MS.
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;MRM, te aroturuki tauhohenga maha.
I roto i nga tauira autoclaved katoa, me te kore NaOH ranei, i tino whakahekehia te kukū o te BDDE (tae atu ki te 16.6 wa) (tauira 5-8, Ripanga 2).Ko te heke o te kukū o te BDDE na te mea i nga wera nui, ka taea e te wai te mahi hei turanga (nucleophile) hei whakatuwhera i te mowhiti epoxide o BDDE hei hanga i te 1,2-diol pūhui.Ko te kounga monoisotopic o tenei pūhui he rereke ki tera o te BDDE, na reira ka kore e pa.I kitea e LC-MS te nekehanga papatipu o 203.30 / 129.10 Da.
Hei whakamutunga, ko enei whakamatautau e whakaatu ana ko te whakatipuranga o nga tihi hou e whakawhirinaki ana ki te aroaro o te BDDE, NAOH, me te tukanga autoclaving, engari kaore he mahi ki te HA.
Ko te tihi hou i kitea i te wa pupuri tata ki te 2.71 meneti ka tohuhia e te LC-MS.Mo tenei kaupapa, ko te BDDE (9.9 mg / mL) i whakauruhia ki roto i te 1% NaOH wairewa wai me te autoclaved.I te Ripanga 4, ka whakatauritehia nga ahuatanga o te tihi hou ki te tihi tohutoro BDDE e mohiotia ana (te wa pupuri tata ki te 3.47 meneti).I runga i te waahanga wehewehenga katote o nga tihi e rua, ka taea te whakatau ko te tihi me te wa pupuri o nga meneti 2.72 e whakaatu ana i nga waahanga rite tonu ki te tihi BDDE, engari he rereke nga kaha (Whakaahua 6).Mo te tihi e rite ana ki te wa pupuri (PIS) o nga meneti 2.72, i kitea he tihi kaha ake i muri i te wehenga i te papatipu o 147 Da.I te kukū o te BDDE (9.9 mg/mL) i whakamahia i roto i tenei whakatau, i kitea ano nga momo whakaurunga rereke (UV, λ=200 nm) i roto i te hihinga ultraviolet i muri i te wehenga chromatographic (Whakaahua 7).Ko te tihi me te wa pupuri o te 2.71 meneti ka kitea tonu i te 200 nm, kaore e taea te kite i te tihi BDDE i roto i te chromatogram i raro i nga tikanga ano.
Ripanga 4 Ko nga hua tohu o te tihi hou me te wa pupuri mo te 2.71 meneti me te tihi BDDE me te wa pupuri o te 3.47 meneti
Tuhipoka: Ki te whiwhi i enei hua, i mahia nga tātaritanga LC-MS me HPLC (MRM me PIS) i runga i nga tihi e rua.Mo te tātari HPLC, ka whakamahia te kitenga UV me te roangaru o te 200 nm.
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;HPLC, chromatography wai mahi teitei;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;MRM, te aroturuki tauhohenga maha;m/z, ōwehenga papatipu ki te utu;PIS, hua Katote matawai;rama ultraviolet, rama ultraviolet.
Tuhipoka: Ka whiwhi nga kongakonga papatipu ma te tātaritanga LC-MS (PIS).Te chromatogram o runga: tuāwhiorangi papatipu o nga kongakonga tauira paerewa BDDE.Te chromatogram o raro: Ko te hiranga papatipu o te tihi hou kua kitea (RRT e hono ana ki te tihi BDDE he 0.79).I tukatukahia te BDDE ki te 1% otinga NaOH me te autoclaved.
Nga Whakapoto: BDDE, 1,4-butanediol diglycidyl ether;LC-MS, chromatography wai me te spectrometry papatipu;MRM, te aroturuki tauhohenga maha;PIS, matawai katote hua;RRT, wa pupuri whanaunga.
Whakaahua 7 Ion chromatogram o te 203.30 Da precursor katote, me te (A) te tihi hou me te wa pupuri o 2.71 meneti me te (B) te kitenga UV o te BDDE tohu tohu teitei teitei i te 3.46 meneti i te 200 nm.
I roto i nga hydrogels HA hono-whakawhiti katoa i hangaia, i kitea ko te toenga o te BDDE i muri i te inenga LC-MS he <2 ppm, engari i puta mai he tihi hou i te tātaritanga.Ko tenei tihi hou kaore e rite ki te hua paerewa BDDE.Ko te hua paerewa BDDE kua tukuna ano te huringa o te kounga (MRM 203.30/129.10 Da) tātaritanga i roto i te aratau MRM pai.Ko te tikanga, ka whakamahia etahi atu tikanga wetewete penei i te chromatography hei whakamatautau tepe ki te kimi i te BDDE i roto i nga hydrogels, engari he iti iho te tepe kitenga teitei (LOD) i te 2 ppm.I tetahi atu taha, i tenei wa, kua whakamahia te NMR me te MS ki te tohu i te tohu o te whakawhiti me te whakarereketanga o HA i roto i nga waahanga huka o nga hua HA hono-whakawhiti.Ko te kaupapa o enei tikanga kaore ano kia ine i te toenga o te kitenga BDDE i nga kuhanga iti penei i ta maatau e whakaahua i tenei tuhinga (LOD o ta maatau tikanga LC-MS = 10 ppb).
Wā tuku: Sep-01-2021